超滤离心管常见问题三（实验操作）

超滤离心管常见问题三（实验操作）

1.       Amicon Ultra超滤管的膜会因为离心时间过长而变干么？

不会，因为Amicon Ultra有死体积设计，总会有溶液残留在滤管中。

2.       Amicon Ultrar超滤管可以用酒精消毒灭菌么？

Amicon Ultra装置与70%乙醇是兼容的，但是对灭菌处理的具体方法没有做相关的测试，所以无法提供更进一步的参考信息。

3.       Amicon Ultra超滤装置是否可以用于高压灭菌？

不可以，Amicon Ultra都是采用热封设计，不可以用高压高温灭菌。

4.       Millipore是否提供无热源的超滤装置？

Millipore提供的超滤装置均非无热源的，即使是无菌装置也可能包含热源。

5.        Amicon Ultra超滤管是否不含RNA酶？ 

不保证超滤管不包含RNA酶，建议用0.1% DEPC在37度浸泡2小时，以完全 灭活RNA酶。残留的DEPC可以用超纯水洗涤除去。

6.       说明书中推荐在室温下进行离心，考虑到蛋白的稳定性，是否可以在4℃进行离心？

可以，但是低温会增加蛋白样品的粘性，导致流速减慢，建议可将离心时间延长到原来的 1.5倍。

7.       如何对超滤管进行去除内毒素的处理？

超滤管是没有经过去内毒素处理的，同时由于内毒素通常以多聚体的形式存在，大小在10-1000KD之间不等，在超滤的过程中是无法去除的。可在实验前通过先用 0.5M NaOH预清洗，随后用Milli-Q水/缓冲液buffer清洗的步骤去除大部分内毒素。

8.       处理后样品怎样收集？

两种方式：移液枪转移和反转离心

（1） 对于15 mL和4 mL的超滤管，可以直接通过移液枪收集处理后样品

（2） 对于0.5 mL的超滤管，可以通过反转离心的方式收集处理后样品：将有浓缩样品的超滤管（内管）倒置于新的离心管中后，低速离心（1,000 g）后将样品重新离心到新离心管中。